一、原理
将种公牛精液中的精子通过物理分离法、免疫学分离法或流动细胞检索分离法，使X染色体和Y染色体进行有效分离，含X染色体的精子分装冷冻后进行人工授精，母牛怀孕后可产母牛犊，相反含有Y染色体的精子分装冷冻后进行人工授精，母牛怀孕后可产公牛犊。
无论哪种分离方法，需要满足以下条件，才能认定分离成功：分离后含有X染色体的精子或含有Y染色体的精子量要大，能重复得到相似结果分离后的精子能与卵母细胞正常受精分离后的精子生产的胚胎或受孕后所生产犊牛性别满足期望的要求。
二、操作方法
清理宿粪，清洁外阴，操作者将清洁消毒后的手缓慢伸入直肠找到子宫颈，另一只手持输精管插入引道，呈前高后低姿势，防止错插入尿道，之后转入水平前进，插到宫颈口，然后慢慢通过子宫颈，进入子宫体。
三、注意事项
1.要选择好母牛。一般选择初配母牛或者经产三胎内的母牛为宜。同时，母牛应健康无疫病。
2.要做好性控冻精的保存。性控冻精通常使用液氮进行保存，要使用液氮罐进行保存，保存过程中要及时补充液氮，不要撞击和倾斜液氮罐。如果将冻精转移到其他容器中，动作一定要快。
3.判断配种时间。通常发情后10-12小时可进行配种。也可通过直肠检查法判断卵泡的发育程度，卵泡膜变薄、表面光滑，卵泡波动明显时可进行配种。
4.要做好输精准备工作。一是，做好发情母牛的保定和外阴清洗二是，做好输精器具的清洗和消毒三是，做好精液准备，要将液氮罐拿到现场，解冻后要立即进行输精。解冻方法是，将冻精从液氮罐中取出，立即放入38摄氏度左右的清水中，一般浸泡时间在10秒钟左右，取出用无菌干脱脂棉擦干，剪断封口装入输精枪。
5.要掌握好输精时间和部位。初配母牛可进行两次输精，第一次于发情后12-20小时，间隔8-12小时可在输精1次。输精部位要选择在排卵一侧的子宫角位置，采用子宫体深部输精。
6.要做好人员准备。输精人员要穿戴好防护装备，修剪指甲，手臂消毒，带长臂手套，手臂涂抹润滑剂等等。
